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Filtre de fluorescence – Filtre d'imagerie par fluorescence
Les filtres de fluorescence se composent généralement d'une combinaison à trois couches : un filtre d'excitation, un filtre d'émission et un miroir dichroïque.
Filtre d'excitation (filtre exciteur, filtre d'excitation) : En microscopie à fluorescence, ce filtre ne laisse passer que les longueurs d'onde capables d'exciter la fluorescence. Auparavant, on utilisait des filtres passe-bande à courte longueur d'onde ; de nos jours, ce sont principalement des filtres passe-bande qui sont employés. Le boîtier du filtre est marqué par une flèche indiquant la direction recommandée pour la propagation de la lumière.
Filtre d'émission (filtre d'émission, filtre de barrière, émetteur) : Ce filtre sélectionne et transmet la fluorescence émise par l'échantillon tout en bloquant les autres longueurs d'onde de lumière. La longueur d'onde d'émission est supérieure à la longueur d'onde d'excitation (plus proche de l'extrémité rouge du spectre). On peut utiliser soit un filtre passe-bande, soit un filtre passe-longueurs d'onde comme filtre d'émission. Le boîtier du filtre est marqué d'une flèche indiquant la direction recommandée pour la propagation de la lumière.
Miroir dichroïque (diviseur de faisceau dichroïque, diviseur de faisceau dichromatique) : Également appelé filtre dichroïque ou miroir séparateur de couleurs. Il est placé à un angle de 45° par rapport à la trajectoire optique du microscope. Ce filtre réfléchit une couleur de lumière (la lumière d'excitation) et transmet une autre couleur de lumière (la lumière d'émission). La réflectance de la lumière d'excitation dépasse 90 %, et la transmittance de la lumière d'émission dépasse 90 %. La partie du spectre qui ne peut pas passer à travers le filtre est réfléchie plutôt qu'absorbée. Étant donné que les couleurs de la lumière transmise et de la lumière réfléchie sont complémentaires l'une de l'autre, ce filtre est également appelé filtre dichroïque.
Les filtres de fluorescence, abrégés en filtres d'imagerie par fluorescence, sont des composants essentiels utilisés dans les instruments de biologie médicale et des sciences de la vie. Leur fonction principale est de séparer et de sélectionner les bandes spectrales caractéristiques de la lumière d'excitation et de la fluorescence émise dans les systèmes de détection et d'analyse par fluorescence biomédicale. En général, ces filtres doivent posséder une profondeur de coupure en densité optique (DO) d'au moins 5 (densité optique, DO = -lgT). Les exigences fondamentales pour les filtres utilisés dans les systèmes de détection par fluorescence incluent une forte raideur de coupure, une transmittance élevée, une grande précision de positionnement, une profondeur de coupure importante ainsi qu'une excellente stabilité environnementale.
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